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简答题简述三粗(蛋白、脂肪、总糖)测定的基本原理和方法。
  • 1、蛋白质(常量凯氏定氮法)样品与浓硫酸和催化剂一同加热消化,使蛋白质分解,其中C和H被氧化为CO2和H2O逸出,而样品中的有机氮转化为氨,并与硫酸结合生成硫酸铵,然后加碱蒸馏,使氨蒸出,用硼酸吸收后再以标准盐酸或硫酸溶液滴定。根据标准酸消耗量可计算出蛋白质的含量。整个过程分三步:消化、蒸馏、吸收和滴定。
    2、脂肪(索氏提取法)将经前处理的样品用无水乙醚或石油醚回流提取,使样品中的脂肪进入溶剂中,蒸去溶剂后所得到的残留物即为脂肪。
    方法:接收瓶干燥至恒重、样品预处理、虑纸筒的制备、索氏提取器的连接、抽提、溶剂回收、接收瓶干燥、称重。
    3、总糖的测定(直接滴定法)样品经前处理除去蛋白质等杂质后,加入盐酸,在加热条件下使蔗糖水解为还原性单糖,以直接滴定法测定水解后样品中还原糖总量。
    直接滴定法测定原理:将一定量的碱性酒石酸铜甲、乙液等量混合,立即生成天蓝色的氢氧化铜沉淀,这种沉淀很快与酒石酸钾钠反应,生成深蓝色的酒石酸钾钠铜络合物。在加热条件下,以次甲基亮蓝为指示剂,用样液滴定,样液中的还原糖与酒石酸钾钠铜反应,生成红色的氧化亚铜沉淀;这种沉淀与亚铁氰化钾络合生成可溶的无色络合物;二价铜全部被还原后,稍过量的还原糖把次甲基亮蓝由蓝色变为无色,即为滴定终点,根据样液消耗量可计算出还原糖含量。
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