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简答题试述药用菌菌种保藏的原理、基本手段和方法。
  • (一)、斜面低温保藏法:菌种在适宜的斜面培养基上培养成熟后,移入4℃~6℃的低温下保藏,以后每隔2~3个月转一次。这种方法适用一般药用菌。
    (二)、矿油保藏法:石蜡灭菌(1.5Kg/m2压力下60min;灭菌后再放入40℃烘箱或恒温箱中使其水分蒸发至完全透明为止);按无菌操作将石蜡注入待保藏的试管斜面内,塞外用蜡封好;保藏在4-15℃的环境中,一般可保藏5年之久。使用时不必倒出石蜡,直接挑取菌丝块即可转管。
    (三)、冷冻干燥保藏法:在低于-15℃下,快速将细胞冻结,并保持细胞完整,然后在真空中使水分升华致干。在此环境中,微生物的生长和代谢都暂时停止,不易发生变异,故可长时间保存,一般为5~10年,最多可达20年之久。
    (四)、液氮超低温保藏法:将保藏的菌种密封在有保护剂的安瓿管里,经控制速度预冻,再置于-150℃~-196℃液态氮超低温冰箱里保存。其原理是采用超低温手段,使生物的代谢水平降低到最低的限度,在此条件下保藏,能保持其性状基本上不发生变异。
    (五)、其他保藏方法:1、菌丝球生理盐水保藏法2、麦粒保藏法3、沙土保存法4、干孢子真空保藏法5、滤纸片保藏法。
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