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简答题用基因工程的方法，使大肠杆菌生产出鼠的β-珠蛋白，想一想，应如何进行设计。
  • 1、首先，选择具有合适启动子的、多克隆位点有合适酶切位点的、具有选择性标记（如抗性标记）的大肠杆菌质粒载体。
    2、测定鼠β-珠蛋白的基因序列，并依此设计带有质粒相应酶切位点的引物；提取鼠DNA，以此为底物，PCR方法进行体外基因克隆，纯化待用。
    3、制备大肠杆菌感受态细胞备用。
    4、提取质粒DNA，纯化，待用。
    5、将质粒和克隆所得基因用限制性内切酶切割，并用连接酶连接。
    6、用连接液和感受态细胞混合，用连接质粒转化大肠杆菌。
    7、在合适的抗性标记培养基上筛选转化细胞。
    8、传代验证其稳定性后，鉴定为质粒重组阳性者，便可用于进行生产鼠的β-珠蛋白。

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