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简答题简述生物酶固定化工艺中常用的方法类型。
  • 载体结合法，具体包括：物理吸附法、离子结合法、共价结合法、交联法、包埋法。
    1、物理吸附法（氢键、疏水键）：酶被物理吸附于不溶性载体，载体有活性炭、多空玻璃、大孔型合成树脂、陶瓷优点：酶活性中心不易被破坏和酶高级结构变化少 缺点：酶与载体相互作用力弱，酶易脱落
    2、离子结合法（离子键）：酶通过离子键结合于具有离子交换基的水不溶性载体，载体有多糖类离子交换剂、合成高分子离子交换树脂
    优点：操作简单，处理条件温和，酶的高级结构和活性中心的氨基酸残基不易被破坏，酶活回收率较高
    缺点：载体与酶的结合力较弱，易受缓冲剂种类活PH的影响
    3、共价结合法：将载体有关基团活化然后与酶有关基团发生偶联反应；在载体上接上一个双功能试剂，然后将酶偶联上去
    优点：酶与载体结合牢固，不会因底物浓度高或存在盐类等原因而轻易脱落
    缺点：反应条件苛刻，操作复杂，高级结构变化，活性中心遭到破坏，不能用于微生物固定
    4、交联法：双功能或多功能试剂使酶与微生物或微生物与微生物细胞之间交联的固定化方法，不使用载体
    优点：固定化酶比活提高
    缺点：反应条件激烈，固定化的酶活回收率比较低
    5、包埋法
    网格型：将酶或微生物包埋在高分子凝胶细微网格中；
    微囊型：将酶或微生物包埋在高分子半透膜中
    优点：颗粒小有利于底物和产物扩散，半透膜可阻止蛋白质分子渗漏和进入，注入体内可避免引起免疫过敏反应，使酶免遭蛋白水解酶的降解 缺点：反应条件要求，高制备成本高
    优点：不需与酶蛋白的氨基酸残基进行结合反应，很少改变酶的高级结构，酶活回收率高

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