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简答题简述赖氨酸生产菌的选育原则。
  • 出发菌株的选择：要求代谢比较简单的细菌（如黄色短杆菌、谷氨酸棒杆菌、乳酸发酵短杆菌等）
    1.优先合成的转换：渗漏缺陷型的选育。降低高丝氨酸脱氢酶活性，使代谢流转向优先合成赖氨酸。高丝氨酸脱氢酶渗漏缺陷型。
    2.切断支路代谢：营养缺陷型的选育。黄色短杆菌、谷氨酸棒杆菌，对天冬氨酸激酶的反馈抑制是赖氨酸+苏氨酸的协同作用，通过诱变使高丝氨酸脱氢酶缺失，切断通向苏氨酸、蛋氨酸的代谢流，控制培养基高丝氨酸（或苏氨酸+蛋氨酸）量，降低苏氨酸浓度，解除协同反馈作用，过量积累赖氨酸。
    3.抗结构类似物突变株的选育（代谢调节突变）。
    优点：突变株遗传性地解除了终产物对自身合成途径的酶的调节控制，不受培养基中所要求物质浓度的影响，生产较稳定。通过诱变使天冬氨酸激酶编码的结构基因发生突变，对赖氨酸及结构类似物不敏感，即使有过量苏氨酸存在，该酶也不与赖氨酸或结构类似物结合，但酶活性中心不变。
    4.解除代谢互锁：
    ①选育亮氨酸缺陷型菌株，或者以抗AEC的赖氨酸的生产菌为出发菌株，经诱变得到抗AEC兼抗亮氨酸缺陷型菌株。
    ②选育抗亮氨酸结构类似物的突变株，从遗传上解除亮氨酸对DDP合成酶的阻遏。
    ③选育对苯醌或喹啉衍生物敏感菌株，这是一种寻找亮氨酸渗漏缺陷型菌株的有效方法。
    5.增加前体物的生物合成和阻塞副产物的生成：
    方法：
    ①选育丙氨酸缺陷型；
    ②选育抗天冬氨酸结构类似物突变株；
    ③选育适宜的CO2固定酶/TCA循环酶活性比突变株
    6.改变细胞膜的透过性
    7.选育温度敏感突变株：天冬氨酸系分枝代谢途径中，末端产物种类多，调节机制复杂，为高效率生产赖氨酸，可以采取顺次解除各种调节机制的诱变育种，获得多重标记的突变株。
    8.应用细胞工程和遗传工程育种
    9.防止高产菌株回复突变：选育遗传性稳定的菌株、定向赋加生产菌多个遗传标记、菌种培养和保藏时，培养基要丰富，尤其有足够的要求营养物、培养时添加抗生素，抑制恢复突变株的生长，达到分纯的目的。

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