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简答题双水相萃取的概念？为什么要进行双水相萃取？双水相萃取的主要操作原则是什么？有何注意事项？
  • 双水相萃取：利用被提取物在二相中的分配不同而实现分离的目的；由于蛋白质在有机相中容易失活，因此采用的二相均为亲水相，如PEG/葡聚糖、PEG／无机盐等，称为双水相，两相密度不同，轻相富含一种高分子，重相可能富含另一高分子，细胞碎片和蛋白质在二相间的分配系数不同，从而实现分离的目的。
    进行双水相萃取的原因：
    核酸等大部分杂质一般处于下相，可以一并除去；
    下相是无机盐富集相，作为废弃物成本低些；
    蛋白质保持于上相的PEG层有利于其活性的保持；
    碎片在下相有利于离心机的连续分离。
    双水相萃取的主要操作原则是：将碎片分配在下层（调节PEG和无机盐浓度比例，可以控制细胞碎片在上下层间的分配）。
    做的时候要考虑以下几点：PEG浓度；PEG分子量；盐和pH值。

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