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简答题在诱变育种中为什么要采用应单细胞(或单孢子)?如何制备它们悬浮液?
  • 诱变处理一般均采用生理状态一致的单细胞或单孢子进行,这是因为一方面分散状态的细胞可以均匀地接触诱变剂,另一方面又可以避免长出不纯的菌落。处理前应尽可能达到同步生长状态。具体方法:将细菌培养液以3000r/min离心5min,倾去上清液,将菌体打散加入无菌生理盐水再离心洗涤。处理的细胞悬浮液要经过玻璃珠振荡打散,并用脱脂棉或滤纸过滤,以形成单细胞状态,一般处于浑浊态的细胞液含细胞数可达108个/ml左右。
    霉菌诱变处理应采用孢子悬浮液,也应经打散和过滤成单孢子状态;单孢子悬液制备方法:取斜面,加入6ml0.1mol/LpH6.0的磷酸缓冲液,用接种环刮下孢子,振荡试管,立即通过带滤纸漏斗过滤,由此制得单孢子悬液,若孢子液浑浊状,其孢子浓度可达106个/ml。
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