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简答题简述液氮超低温保藏法的原理及方法。
  • 原理：液氮温度为-196℃，远低于新陈代谢停止的温度（-130℃），在此条件下菌种生长繁殖、代谢全部停止，不会产生变异。是一种长期保存菌种的方法。
    方法：待保藏菌种制备菌悬液，加入甘油作为保护剂，甘油终浓度为10%；然后冻结，从0℃到-35℃，其降温速度为每分钟1℃，这样可以使细胞内的自由水通过膜渗出而不形成冰晶刺破细胞；然后放入液氮保存；重新培养时，需将安瓿管在35~40℃水浴中迅速解冻，打开安瓿管，转移菌种至适宜的培养基培养。

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