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简答题简述基因工程中常用的几种工具酶。
  • (1)限制性核酸内切酶:主要用途是识别DNA特定序列,切断识别点或其周围的DNA链,分为Ⅰ类、Ⅱ类和Ⅲ类酶。其中Ⅰ类限制性核酸内切酶由3中不同亚基构成,兼具有修饰酶活性和依赖于ATP的限制性内切酶活性,它能识别和结合于特定的DNA序列位点,去随机切断在识别位点以外的DNA序列;Ⅱ类酶切割DNA特异性最强,Ⅲ类酶与Ⅰ类酶相似,是多亚基蛋白,既有内切酶活性又有修饰酶活性
    (2)DNA连接酶:催化DNA中相邻的5‘磷酸基与3’羟基间形成磷酸二酯键,是DNA片段之间的切口封和,主要是将不同的DNA片段连接起来
    (3)DNA聚合酶:催化DNA体外合成反应,大多数需DNA模板,合成产物的序列与模板互补
    (4)磷酸酶:去除DNA的5‘磷酸基团的催化特性,可被用于抑制质粒DNA的自身连接和环
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