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- 简答题叙述随机诱变技术?
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随机诱变在突变位置上随机地引入一种突变。人们通常用将基因克隆到质粒上,旁边有两个仔细选择紧密相连的限制性酶切位点,双酶解后产生一个3’凹陷的末端和一个5’凹陷末端:与克隆基因相邻的末端是3’凹陷,而另一末端是5’凹陷。
大肠杆菌核酸外切酶EⅢ从凹陷的3’端降解DNA,不能从5’端降解,也不能从突出的3’端降解。向体系中加ExoⅢ,一段时间后终止反应,再用Klenow片段补平,补平时加入4种脱氧核苷三磷酸和一种脱氧核苷三磷酸的类似物,将修复后的质粒转化大肠杆菌,此质粒的一个或多个位点含有脱氧核苷酸的类似物,在后续质粒复制过程中,核苷酸类似物会在互补链中随机引入一个核苷酸 关注下方微信公众号,在线模考后查看
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