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简答题常用的噬菌体载体有哪些?各有什么特点?
  • λ噬菌体:λ噬菌体是温和噬菌体,注入的DNA整合到大肠杆菌染色体中,与染色体一起复制,在某种营养或环境胁迫条件下,整合的λ噬菌体DNA被切割出来,进入裂解循环。λ噬菌体是一种线状双链分子,其中大约20kb对于整合/切割过程极为关键,称整合/切割(I/E)区域。构建核基因文库来时,将这20kbDNA片段去掉,强迫重组λ噬菌体进入裂解循环。
    M13载体:M13载体是一种细丝状的特异性大肠杆菌噬菌体—单链噬菌体载体。可插入外源DNA而不影响噬菌体增殖。M13感染细菌后呈双链复制型(RF)DNA。允许包装大于病毒单位长度的外源DNA;感染细菌后复制环状DNA经包装形成噬菌体颗粒,分泌到细胞外而不溶菌。这些特性便于分离单链DNA,且在产生大量的单链DNA中,含有外源DNA序列。可用于DNA序列分析、制备杂交探针、定点突变等。
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