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简答题诱变育种时为什么要进行同步培养?简述孢子悬液菌悬液的制备方法?
  • 同步培养:采用生理状态一致的单细胞或孢子进行诱变处理,不但能均匀的接触诱变剂,还可减少分离现象;一般处理细菌的营养细胞,采用生长旺盛的对数期,其变异率较高且重现性好;刚成熟时孢子变异率高,或在处理前将孢子培养数小时,使其脱离静止状态,则又诱变率也会增加。
    菌悬液制备:在诱变处理前进行摇瓶振荡培养,利用温度碳源控制其同步生长,离心洗涤、用生理盐水或缓冲液制备菌悬液,放在有玻璃珠的三角瓶内振荡10min,用无菌脱脂棉或滤纸过滤,通过菌体计数调整浓度,10^8个/mL。
    孢子悬液:在试验中尽量采用刚刚成熟的孢子,并置于液体培养基中振荡培养到孢子刚萌发,即芽长相当于孢子直径的0.5-1倍,离心洗涤,加入生理盐水或缓冲液,振荡打碎孢子团体,以脱脂棉过滤计数,调整孢子悬液浓度供诱变处理,10^6个/mL。
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