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简答题简述高效液相色谱法测定食品中维生素A及E原理及操作步骤。
  • 样品中的维生素A及E皂化提取处理后,将其从不可皂化部分提取至有机溶剂中。用高效液相色谱C18反相柱将维生素A及E分离,经紫外检测器检测,并用内标法定量测定。
    操作步骤:1、皂化:样品于皂化瓶中,加无水乙醇搅拌,颗粒物分散均匀为止。加10%抗坏血酸,苯并芘内标液,混匀。加氢氧化钾混匀,废水与回流30min皂化完全。
    2、提取:将皂化后的样品移入分液漏斗,静层,弃去水层。用水洗分液漏斗中乙醚层,至不显碱性。
    3、浓缩:将乙醚提取液经过无水硫酸钠滤至旋转蒸发瓶,待瓶中约2ml取出,用氮吹去掉乙醚,加入乙醇,混合提取。2样品分析:去样品浓缩液20ul,待绘制出色谱图后,再进行定性和定量。
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