简述硫色素荧光法测定维生素B<sub>1</sub>原理及操作步

正确答案：硫胺素在碱性铁氰化钾溶液中被氧化成硫色素（噻嘧色素），在紫外线下，硫色素发出荧光。在给定的条件下，以及没有其他物质干扰时，此荧光强度与硫色素量成正比，即与溶液中硫胺素量成正比。从而测定其含量。
操作步骤：提取：样品加入盐酸溶解，高压锅水解，pH调4.5.加淀粉酶和蛋白酶，45℃过夜保温。凉至室温，定溶，过滤提取。净化：加活性人造浮石的盐基交换柱，热蒸馏冲洗3次，加酸性氯化钾，凉至室温，酸性氯化钾定溶。氧化：样品精化液加入A，B两个反映瓶。避光，氢氧化钠加入A瓶，碱性铁氰化钾加入B瓶，振摇，加入正丁醇，用力振摇。测定：荧光测定条件：365nm；发射波长435nm；激发波狭缝5nm。依次测定样品空白，A，标准空白应该强度A，样品空白B，标准荧光强度B。
答案解析：
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