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简答题 限制性内切核酸酶的特点与使用注意事项有哪些？
  • 一类专门切割DNA的酶，它们能特异结合一段被称为限制酶识别顺序的特殊DNA序列。并切割dsDNA。
    所谓限制（restriction）=切割（clearagE.=水解（hydrolysis）该部位的核苷键（磷酸二酯键）限制酶都是从原核生物中发现的（400多种E/350M）。所有的限制酶可分成3类。
    （1）Ⅰ、Ⅲ型，兼具限制与修饰活性，它们识别与切割顺序不在一个地方，不产生特异性的DNA片段，与基因工程意义不大（有说Ⅲ型识别核苷酸切割的位点一致，但罕见）。
    （2）Ⅱ型基因工程说到的限制酶是Ⅱ型酶，具有此类酶的微生物限制－修饰系统分别由限制酶和甲基化酶来完成。Ⅱ型酶分子量小，仅需Mg2+作为催化反应的辅因子，识别与切割位点相同，产生特异的DNA片段。

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