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简答题什么是cDNA文库法?它的构建流程是什么?
  • cDNA:指体外用逆转录酶催化,以mRNA为模板合成的互补DNA。
    cDNA文库:汇集某生物成熟mRNA为模板逆转录而成cDNA序列的的重组DNA群体.Λ噬菌体和质粒为载体构建。
    操作程序
    (1)总RNA的提取;注意抑制RNA酶的活性,盐酸胍,二乙基焦碳酸;
    (2)mRNA的分离:选用高度分化的组织,末端带有polyA;
    (3)cDNA双链的合成;
    (4)cDNA与载体的连接;
    (5)噬菌体的包装以及转染或质粒的转化。
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