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简答题简述常用目的基因制备的方法及其原理?
  • 生物学方法;化学合成法;基因文库法;利用PCR扩增法。
    原理:
    ①生物学方法是采用基因工程手段把染色体DNA用限制内切酶切割,将所有片段都连接到某种载体上,转入大肠杆菌中增殖,再用适当方法来筛选含该基因的重组体菌落,从重组题细菌提取DNA,经酶切后得到目的基因。
    ②化学合成法是以单核苷酸为原料,在体外用化学方法按照已知基因的碱基序列,先合成DNA短片段,再依次连接而成完整的目的基因链。
    ③基因文库法是将某种生物全部基因组的遗传信息,贮存在可以长期保存的稳定重组体中,以备需要时能够随时应用它分离所需要的目的基因。
    ④利用PCR扩增法是在模板DNA、引物和4种脱氧核糖核苷酸存在的条件下,利用DNA聚合酶催化合成反应,体外扩增特异DNA片段。
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