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简答题碱性酒石酸铜滴定法原理及操作步骤。
  • 原理:样品多糖沉淀经过酸水解后,全部转成单糖,在加热条件下,以亚甲基做指示剂,直接滴定标定过的碱性酒石酸铜液,根据样品液消耗的体积即可计算出还原糖含量,然后再乘以换算系数0.9,计算多糖含量。
    主要仪器:水解瓶(带冷凝回流装置)、酸式滴定管。
    操作步骤:样品处理:1、不含淀粉的样品:90℃热搅拌,取一定量待测也加乙醇,离心。取沉淀物加浓盐酸,沸水浴2h,冷却。调pH6.8—7.2。移入容量瓶定溶。2、含淀粉样品:90℃加热,糊化,加淀粉酶溶液,乙酸钠缓冲液,55℃保温1h。加热沸腾,加1%葡萄糖酶,转移37℃,淀粉全部酶解。保温24h再移入蒸发皿中,浓缩,冷却,移入容量瓶定溶,过滤。用无水乙醇沉淀多糖,用85%乙醇沉淀2次,中和。样品测定:加碱性酒石酸钠甲液及乙液,锥形瓶中,从滴定管滴加比预测样品溶液体积少1.0ml试样溶液至锥形瓶。加热,煮沸,然后滴定,待溶液颜色变浅时,控制速度,直溶液蓝色刚好褪去为终点,读数。
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