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简答题简述高效液相色谱法测定胡萝卜素原理及操作步骤。
  • 样品中的β-胡萝卜素,用石油醚+丙酮混合液提取,经三氧化二铝纯化,然后用高效液相色谱法测定,以保留时间定性,峰高或峰面积定量。
    操作步骤:样品提取:淀粉类食品:样品用石油醚或石油醚+丙酮混合液振摇提取,吸取上层黄色液体并转入蒸发器中,重复提取至无色。合并提取液,于旋转蒸发器上蒸发至干。液体食品:样品加石油醚+丙酮反复提取,分层,将下层水溶液放入另一分液漏斗中再提取至无色。合并提取液与旋转蒸发器蒸干。油类食品:样品加石油醚+丙酮反复提取,上层提取液为无色,合并提取液,蒸干。纯化:将样品提取液残渣,用石油醚溶解,进行氧化铝层析。用洗脱液丙酮+石油醚洗氧化铝柱,再加入溶解样品提取液的溶液,用丙酮+石油醚洗脱β—胡萝卜素,收集于容量瓶中。样品测定:20ul进样。
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